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技術文章

Technical articles

2014
9-16

ELISA法細胞凋亡檢測操作步驟
細胞凋亡的發(fā)生是由于鈣-鎂依賴性核酸酶進入核小體間切割DNA,產(chǎn)生180bp～200bp或其倍數(shù)的核小體片段。而核小體由于與組蛋白H2A、H2B、H3和H4形成緊密復合物而不被核酸內切酶切割。采用雙抗體夾心酶免疫法，應用小鼠抗DNA和抗組蛋白的單克隆抗體，與核小體片段形成夾心結構，可特異性檢測細胞溶解物中的核小體片段。常見樣本以及基本操作方法：1.收集細胞，離心后，用200µl溶細胞緩沖液重新懸浮，室溫下作用30min。（培養(yǎng)細胞的上清液、血漿和血清都可作為檢測樣...
2014
9-9

大鼠胰島素ELISA試劑盒相關介紹
胰島素是由胰島B細胞受內源性或外源性物質如葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸、胰高血糖素等的刺激而分泌的一種蛋白質激素。胰島素是機體內*降低血糖的激素，同時促進糖原、脂肪、蛋白質合成。大鼠胰島素ELISA試劑盒是一種酶聯(lián)免疫吸附技術，應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠胰島素（INS）水平。用純化的大鼠胰島素（INS）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入胰島素（INS），再與HRP標記的胰島素（INS）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯...
2014
9-3

探討“ELISA實驗重復性不佳及出現(xiàn)白板、陽性對照不顯色”
（一）、重復性不佳可能原因及解決方法？1.樣品數(shù)量多少不一，加樣時間有長有短。重復某一樣品時，加樣時間盡可能與*次接近2.保溫時間不一致，洗滌條件不一致，操作人員不一致。重復測定標本，操作條件、人員等應盡可能與上次保持一致，以排除這些因素造成的不一致的可能性。3.加樣量不一致。樣本稀釋前應充分混勻，盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴。。（二）出現(xiàn)白板，陽性對照不顯色可能原因及解決方法？1.顯色液變質更換新的顯色液2.洗滌液配置有誤請按說明書所示稀釋倍數(shù)配制。3.未加酶結合物而認為...
2014
9-1

在同一條件下做WB實驗為什么一張膜顯影，一張膜未顯影？
近期恒遠經(jīng)常接到客戶的：同一條件下，除了測的指標不一樣，為什么有張膜顯影，有張未顯影？？？上海恒遠技術分析：在同一條件下，如果一張膜顯影，一張膜未顯影，可以逐一查找原因：1、你是否兩張膜上都設有陽性對照？如果有，一張膜有信號，一張沒信號，可能是操作過程中有問題（可能原因是（1）、你結合底物會不會有問題，即沒有充分結合好，或者結合時間太短，（2）、你要確定兩張膜都是用新的底物反應液，（3）、就是沒有信號的膜會不會壓片時間太短，如果使用儀器掃片就不存在這種問題，）所以原因比較多，...
2014
8-18

ELISA實驗加樣步驟不當可能會影響實驗結果及解決方法
ELISA實驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在臨床跟科研得到了廣泛的應用，但操作中的各個環(huán)節(jié)操作不當可能會對實驗的檢測結果影響較大，如不注意，有可能導致顯色不全、花板等結果。現(xiàn)我公司技術人員將加樣操作中常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結于下，以便給同行帶來一些啟發(fā)，提高試驗質量：加樣可能原因：1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣；2)手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時)；3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。解決辦法：1)標本為血清：將血液...
2014
8-14

上海恒遠為您講解：PCR過程Z常見的三種檢測模式
定量PCR（PolymeraseChainReaction）技術有廣義概念和狹義概念。廣義概念的定量PCR技術是指以外參或內參為標準，通過對PCR終產(chǎn)物的分析或PCR過程的監(jiān)測，進行PCR起始模板量的定量。狹義概念的定量PCR技術（嚴格意義的定量PCR技術）是指用外標法（熒光雜交探針保證特異性）通過監(jiān)測PCR過程（監(jiān)測擴增效率）達到定量起始模板數(shù)的目的，同時以內對照有效排除假陰性結果（擴增效率為零）。PCR過程的監(jiān)測有多種檢測模式。zui常用的有三種檢測模式：⑴SYBRGre...
2014
8-7

上海恒遠公司ELISA試劑盒檢測方法
上海恒遠生物科技有限公司總部設在上海，公司專業(yè)經(jīng)營生命科學領域的研究試劑、實驗室消耗品、ELISA試劑盒等，我們致力于向國內外生命科學研究人員提供*的產(chǎn)品和技術服務。首先讓我司的王總來談一下市場。首先R&D和TSZ等一些的ELISA試劑盒還是很值得信賴的，也得到了市場的認可，特別是R&D的盒子，我們賣的很好，就是價格好貴，經(jīng)費不是很充裕的實驗室難消費的起。國內的廠家，質量在靈敏度上和R&D的盒子還是有很大差距，但是有一點是可以肯定的，盒子反映的結果是公正客觀的。還有一個缺點就...
2014
7-30

恒遠為您講解人P選擇素ELISA試劑盒操作中常見的問題及解答
人P選擇素ELISA試劑盒操作過程中常見的問題:1．溫育?溫育是ELISA測定中影響測定成敗zui為關鍵的一個因素。ELISA作為一種固相免疫測定，抗原抗體的結合反應在固相上進行，要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原*結合，必須在一定的溫度條件下反應一定的時間。溫育所需時間與溫度成反比，即溫度越高，則所需時間相對較短。zui為常用的溫育溫度有37℃和室溫，其次是43℃和2～8℃。一些操作者，擅自改變說明書操作，使用自己喜歡的溫育時間和溫育溫度，這樣造成一些不必要的麻...

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